Основни принципи конфокалних ласерских микроскопа
Срж конфокалне ласерске микроскопије лежи у "конфокалној" технологији. Ова технологија користи тачкасти извор светлости (обично ласер) и посебан оптички систем, тако да се само узорак у фокусној тачки осветљава и слика током процеса снимања, док се области изван фокусне тачке занемарују. Овај метод селективног осветљења и детекције значајно побољшава резолуцију и контраст слике.
1. Извор светлости
Конфокални микроскопи користе ласере као изворе светлости јер ласери имају високу монохроматичност, кохерентност и усмереност. Ове карактеристике омогућавају ласерима да обезбеде стабилно осветљење и прецизну контролу фокусирања зрака.
2. Систем осветљења
Систем осветљења укључује ласер и уређај за скенирање. Ласерски зрак се брзо креће кроз уређај за скенирање (обично галванометар) да би се постигло скенирање узорка тачку по тачку. Ова метода скенирања омогућава ласерском зраку да формира низ жаришних тачака на узорку, чиме се постиже слој по слој слика узорка.
3. Конфокални отвор бленде
Између сочива објектива микроскопа и узорка постоји конфокални отвор. Функција овог отвора је да ограничи дубину снимања, а детектор може да прими само светлост која пролази кроз овај отвор. На овај начин у детектор може ући само светло у фокусној тачки, док је светлост изван фокусне тачке блокирана.
4. Објективна сочива
Објективно сочиво је кључна компонента у конфокалној микроскопији, одговорна за фокусирање ласера на узорак и прикупљање светлости која се одбија или емитује назад из узорка. Висококвалитетна сочива објектива могу да пруже слику високе{1}}резолуције.
5. Детектор
Детектор је одговоран за пријем светлости која пролази кроз конфокални отвор и претвара је у електрични сигнал. Ови електрични сигнали се затим обрађују да би се генерисале слике.
6. Обрада слике
Необрађени подаци генерисани конфокалном микроскопијом су серија дводимензионалних слика-које треба да се обради рачунарским софтвером да би се реконструисале тродимензионалне слике-. Овај процес укључује преклапање слике, побољшање и 3Д реконструкцију.
