Поређење конфокалног микроскопа и обичног оптичког микроскопа
Микроскоп је главни алат за посматрање ћелија. У зависности од извора светлости, може се поделити у две категорије: оптички микроскоп и електронски микроскоп. Први користи видљиву светлост (ултраљубичасти микроскоп до ултраљубичастог светла) као извор светлости, док други користи електронски сноп као извор светлости. Обичан оптички микроскоп и ласерски конфокални микроскоп припадају истом оптичком микроскопу.
И. Општи оптички микроскоп
Обичан биолошки микроскоп се састоји од три дела, и то: ① система осветљења, укључујући извор светлости и кондензатор; ② систем оптичког увећања, који се састоји од објектива и окулара, је главно тело микроскопа, како би се елиминисала сферна аберација и хроматска аберација, окулари и објективи су састављени од сложене групе сочива; ③ механички уређај, који се користи за фиксирање материјала и посматрање погодности.
Објект микроскопа је јасан не само одређен увећањем, већ и са резолуцијом микроскопа (резолуцијом), моћ раздвајања се односи на микроскоп (или људско око од мете 25цм) може разликовати објекат зуи у малим интервалима способности да разликовати величину моћи раздвајања одређује таласна дужина светлости и брзина ушћа огледала и индекс преламања медија, изражен у формули:
Р=0.61λ /НАНА=нсин /2 где је: н=индекс преламања средине;=угао ушћа огледала (узорак на отвору сочива објектива угао затезања), НА=брзина ушћа огледала (нумерички отвор). Угао отвора огледала увек треба да буде мањи од 180°, тако да је зуи вредност сина/2 нужно мања од 1.
Индекс преламања стакла који се користи у производњи оптичких сочива је 1,65 ~ 1,78, индекс преламања медија који се користи што је ближе стаклу, то боље. За суво сочиво објектива, медијум за ваздух, брзина отвора огледала је генерално 0.05 ~ 0,95; уљна сочива са кедровим уљем као медијумом, брзина зрцала може бити близу 1,5.
Уобичајена светлосна таласна дужина од 400~700нм, тако да вредност моћи разлучивања микроскопа неће бити мања од 0,2μм, моћ решавања људског ока је 0,2мм, тако да је општи дизајн микроскопа зуи увећање обично је 1000Кс.
Друго, ласерски конфокални микроскоп за скенирање
Ласерски конфокални микроскоп за скенирање (ласерски конфокални микроскоп за скенирање), са ласером као извором светлости за скенирање, тачку по тачку, линију по линију, површину по површину брзо скенирајуће слике, скенирајући ласер и флуоресцентну колекцију заједничког циља, објективно скенирајуће ласерско фокусирање тачке , али и тренутно снимање тачке објекта. Због краће таласне дужине ласерског зрака, сноп је веома фин, тако да конфокални ласерски скенирајући микроскоп има високу резолуцију, око 3 пута већу од обичног оптичког микроскопа. Систем је фокусиран једном и скенирање је ограничено на једну раван узорка. Када дубина фокусирања није иста, могу се добити слике различитих нивоа дубине узорка, а ове информације о слици се чувају у рачунару, путем компјутерске анализе и симулације, може приказати тродимензионалну структуру узорка ћелије. .
