Експериментални принципи методе директног бројања микробне микроскопије
Директно бројање под микроскопом помоћу хемоцитометра је уобичајена метода за бројање микроорганизама. Предност ове методе је у томе што је интуитиван и брз. Ставите одговарајуће разблажену бактеријску суспензију (или суспензију спора) у комору за бројање између стакалца и поклопца хемоцитометра и пребројите под микроскопом. Пошто је запремина коморе за бројање фиксна (0.1 мм2), може се претворити у укупан број микроорганизама по јединици запремине на основу броја микроорганизама посматраних под микроскопом. Пошто ова метода броји укупан број живих и мртвих бактерија, назива се и методом укупног броја бактерија.
Хемоцитометар је обично посебан клизач са четири прореза који формирају три платформе. Средња платформа је кратким хоризонталним жлебом подељена на две половине. На платформи је са сваке стране угравирана квадратна мрежа. Свака квадратна мрежа је подељена на девет великих квадрата. Велики квадрат у средини је соба за бројање. Бројање микроорганизама се одвија у комори за бројање. Структура хемоцитометра је приказана на слици Ⅷ-1.
Скала коморе за бројање генерално има две спецификације. Један је велики квадрат подељен на 16 средњих квадрата, а сваки средњи квадрат је подељен на 25 малих квадрата (слика Ⅷ-2); други је велики трг. Квадратна мрежа је подељена на 25 средњих квадрата, а сваки средњи квадрат је подељен на 16 малих квадрата (слика ВИИИ-1, Ц). Али без обзира каква је табла за бројање, број малих квадрата у сваком великом квадрату је исти, односно 16×25=400 малих квадрата, као што је приказано на слици Ⅷ-2.
Дужина странице сваког великог квадрата је 1 мм, тако да је површина сваког великог квадрата 1 мм2. Након што је покровно стакло покривено, висина између тобогана и покривног стакла је 0.1мм, тако да је запремина коморе за бројање 0.1мм3.
Када бројите, обично пребројите укупан број бактерија у пет средњих квадрата, затим пронађите просечну вредност сваког средњег квадрата, а затим помножите са 16 или 25 да бисте добили укупан број бактерија у великом квадрату, а затим израчунајте Претвори у укупан број бактерија у 1мл бактеријског раствора.
