Да ли сте икада разумели основне принципе фазноконтрастне микроскопије?
Фазно-контрастни микроскоп је изумео холандски научник Зернике 1935. за посматрање необојених узорака. За живе ћелије и необојене биолошке узорке, због разлике у индексу преламања и дебљини микроструктуре сваког дела ћелије, када светлосни талас прође кроз њега, таласна дужина и амплитуда се не мењају, само се мења фаза (разлика амплитуде ), који је невидљив људском оку. посматрати. Микроскоп фазног контраста мења фазну разлику и користи дифракцију светлости и феномене интерференције да промени фазну разлику у разлику амплитуде да би се посматрале живе ћелије и необојени узорци. Разлика између фазног контрастног микроскопа и обичног микроскопа је у томе што се уместо променљиве дијафрагме користи прстенаста дијафрагма, уместо обичног сочива објектива са фазном плочом, а обезбеђен је и телескоп за коаксијалност.
Основни принципи фазноконтрастне микроскопије:
Користећи разлику у индексу преламања и дебљини између различитих структурних компоненти објекта, разлика оптичке путање која пролази кроз различите делове објекта се претвара у разлику у амплитуди (интензитет светлости), а кроз кондензаторско сочиво са прстенастом дијафрагмом и фазна разлика са фазном плочом Сочиво објектива реализује посматрачки микроскоп. Углавном се користи за посматрање живих ћелија или необојених делова ткива, а понекад се може користити и за посматрање обојених узорака којима недостаје контраст.
Оптичка разлика путање видљиве светлости која пролази кроз узорак се мења у разлику амплитуде, чиме се побољшава контраст између различитих структура и чине различите структуре јасно видљивим. Светлост се прелама након проласка кроз узорак, одступа од првобитне оптичке путање и касни за 1/4λ (таласна дужина). Ако се повећа или смањи за 1/4λ, разлика оптичке путање постаје 1/2λ, а два зрака интерферирају након осе светлости. Ојачати, повећати или смањити амплитуду, побољшати контраст.
Микроскоп фазног контраста има две функције које други микроскопи немају: ① одваја директну светлост (позадинско светло у видном пољу) од светлости коју прелама објекат; ② уклања око половине таласне дужине из фазе тако да не може да ступи у интеракцију, што резултира променом интензитета.
