Увод у избор између инвертираних микроскопа и флуоресцентних микроскопа
Микроскоп је важан инструмент у ћелијској култури и сродним експериментима са дериватима. Тренутно на тржишту постоје различите врсте микроскопа, а избор микроскопа који одговара потребама и одговара је изазов. У наставку ћемо представити принципе инвертираних микроскопа и флуоресцентних микроскопа ради лакшег одабира.
Састав инвертног микроскопа је исти као и обичног микроскопа, углавном се састоји од три дела: механичког дела, дела за осветљење и оптичког дела. Састав инвертног микроскопа је исти као и обични усправни микроскоп, само што су сочиво објектива и систем осветљења обрнути, при чему је прво испод позорнице, а друго изнад позорнице. Ова структура омогућава значајно повећање ефективне удаљености између система за фокусирање осветљења и бине, што олакшава постављање дебљих инструмената за посматрање као што су посуде за културу и боце са ћелијском културом (наравно, стаклена стакла су такође прихватљива), док радна удаљеност између сочива објектива и материјала не мора бити велика. Обрнути микроскоп користе медицинске и здравствене установе, универзитети и истраживачки институти за посматрање микроорганизама, ћелија, бактерија, култура ткива, суспензија, седимената итд. Може континуирано да посматра процес репродукције и поделе ћелија и бактерија у медијуму културе, и може да ухвати било које стање током овог процеса. Широко се користи у областима као што су цитологија, паразитологија, онкологија, имунологија, генетски инжењеринг, индустријска микробиологија, ботаника итд.
Флуоресцентна микроскопија се користи за проучавање апсорпције, транспорта, дистрибуције и локализације супстанци унутар ћелија. За тестирани објекат постоје два начина за генерисање флуоресценције: спонтана флуоресценција, која директно емитује флуоресценцију након УВ зрачења; Секундарна флуоресценција се јавља када се посматрани објекат третира флуоресцентним бојама, а затим озрачи ултраљубичастим светлом да емитује флуоресценцију. Неке супстанце у ћелијама, као што је хлорофил, производе спонтану флуоресценцију када су изложене ултраљубичастом зрачењу; Неке супстанце саме по себи не могу да емитују флуоресценцију, али ако су обојене флуоресцентним бојама или флуоресцентним антителима, могу да емитују и секундарну флуоресценцију након зрачења ултраљубичастом светлошћу. Флуоресцентни микроскоп користи високо ефикасан тачкасти извор светлости да емитује одређену таласну дужину светлости (ултраљубичасто светло 365нм или љубичасто плаво светло 420нм) кроз систем филтера у боји као ексцитационо светло, које побуђује флуоресцентне супстанце унутар узорка да емитују различите боје флуоресценције кроз објектив ока, а затим посматрају флуоресценцију објектива. На овај начин, чак и са слабом флуоресценцијом у јакој позадини, лако се препознаје и има високу осетљивост. Углавном се користи за проучавање ћелијске структуре, функције и хемијског састава.
