Упознавање са основним принципима фазноконтрастне микроскопије
Фазноконтрастна микроскопија је посебан микроскоп који претвара разлику оптичког пута (тј. фазну разлику) насталу када светлост прође кроз детаље провидног узорка у разлику интензитета светлости.
Када светлост прође кроз релативно провидан узорак, нема очигледне промене у таласној дужини (боји) и амплитуди (светлини) светлости. Стога, када се посматрају необојени узорци (као што су живе ћелије) обичним оптичким микроскопом, често је тешко разликовати њихову морфологију и унутрашњу структуру. Међутим, због разлика у индексу преламања и дебљини различитих делова ћелије, када светлост прође кроз овај узорак, оптичке дужине путање директне и дифрактиране светлости биће различите. Како се дужина оптичке путање повећава или смањује, фаза светлосних таласа који убрзавају или заостају се мења (ствара фазну разлику). Фазна разлика светлости се не може осетити голим оком, али фазни контрастни микроскоп може да користи свој посебан уређај - прстенасту дијафрагму и фазну плочу да би помоћу феномена интерференције светлости претворио фазну разлику светлости у разлику амплитуде (светло и тамно) које може детектовати људско око. разлика), тако да оригинални провидни објекат показује очигледне разлике у светлу и тами, а контраст је појачан, омогућавајући нам да јасније посматрамо живе ћелије и унутарћелијске компоненте које се не могу видети или не могу јасно видети под обичним оптичким микроскопима и тамним пољем микроскопи. одређене микроструктуре.
Принцип снимања фазног контрастног микроскопа: Извор светлости за микроскопско испитивање може проћи само кроз провидни прстен прстенасте дијафрагме, а затим кондензатором бити кондензован у светлосни сноп. Када овај светлосни сноп прође кроз објекат који треба да се прегледа, светлост ће бити различита због различитих дужина оптичких путања сваког дела. степен отклона (дифракције). Зато што се слика коју формира провидни прстен поклапа са задњом жижном равнином сочива објектива и коњугованом равни на фазној плочи. Дакле, неспрегнута директна светлост пролази кроз коњуговану површину, док одбијена дифрактована светлост пролази кроз компензациону површину. Због различитих својстава површине коњугата и компензационе површине на фазној плочи, они ће произвести одређену фазну разлику и слабљење интензитета у светлости која пролази кроз ова два дела респективно. Два сета светлости се затим конвергирају задњим сочивом и враћају на исту оптичку путању. Путујући, директна светлост и дифрактована светлост ће ометати једно друго, мењајући фазну разлику у амплитудну разлику. На овај начин, током фазноконтрастне микроскопије, светлост која пролази кроз безбојно провидно тело претвара фазну разлику коју људско око не разликује у амплитудну разлику (разлику између светлости и таме) коју људско око може да разликује.
