Напомене и савети о коришћењу неколико фазно контрастних микроскопа
1) Инсталирајте фазни контрастни уређај: уклоните кондензаторско сочиво обичног микроскопа и инсталирајте кондензаторско сочиво са прстенастом дијафрагмом на одговарајући микроскоп; уклоните обично сочиво објектива микроскопа и замените га објективним сочивом са фазном плочом; замените окулар са Фокусирајућим окуларима за фазно контрастне микроскопе; посебни зелени филтери (понекад нису неопходни) постављају се на светлосни улаз извора светлости.
2) Поравнање и фокус светлости: Подесите окулар за фокусирање и завртањ за подешавање дебљине све док се бели круг и црни круг не могу јасно видети у видном пољу. Црни круг је фиксиран, а бели круг се може померати подешавањем завртња на кондензаторском уређају, тако да се црни круг и бели круг потпуно поклапају. Скините окулар за фокусирање и замените га оригиналним окуларом микроскопа да проверите.
Анализа проблема у коришћењу фазног контрастног микроскопа
1. Утицај дебљине узорка Када се врши посматрање фазног контраста, дебљина узорка треба да буде 5 μм или тања. Када се користи дебљи узорак, горњи слој узорка је веома јасан, али дубоки слој ће бити замагљен и изазвати сметње фазног померања. и расејање светлости.
2. Утицај покривног стакла и клизног стакла Узорак мора бити прекривен покривним стаклом, иначе се светли прстен прстенасте дијафрагме и тамни прстен фазне плоче тешко преклапају. Посматрање фазног контраста такође има високе захтеве у погледу квалитета стакла клизног стакла и покровног стакла. Када постоје огреботине, неједнака дебљина или неравнина, појавиће се изобличење светлих прстена и сметње у фази. Поред тога, када је клизач превише дебео или сувише танак, светли прстен прстенасте дијафрагме ће постати већи или мањи.
3. Хало и ефекат бледења У процесу снимања фазног контрастног микроскопа, када структура постане тамна због кашњења фазе, то није губитак светлости, већ резултат прерасподеле светлости на равни слике. Дакле, светлост која се очигледно губи у тамним областима ће се појавити као светли ореол око тамнијих објеката. Ово је недостатак фазноконтрастне микроскопије, која отежава посматрање финих структура, а феномен ореола је озбиљнији када је прстенаста дијафрагма веома уска. Још један феномен у фазно-контрастној микроскопији је ефекат сенчења, који се односи на губитак контраста на ивицама веће површине са истим фазним кашњењем када се посматра фазним контрастом.
4. Фазна инверзија Када је н'н, контраст светлости и таме слике је управо супротан, што се назива фазна инверзија. Непрепознатљиво је када је фазна разлика δ=0, а контраст постаје већи са повећањем δ, а фазна инверзија ће се појавити када δ настави да расте до одређене вредности. Када се користи објектив објектива са 90 процената високе вредности апсорбанције (високог контраста), ова вредност трансформације је око 0.55λ, а када се користи објектив са 70 процената стандардне вредности апсорбанције, она износи око 0,33λ . Објективи са већим вредностима апсорпције треба да се користе за решавање мањих разлика оптичких путања.
