Принцип и структурне карактеристике флуоресцентног микроскопа
Флуоресцентни микроскоп користи тачку са високом светлосном ефикасношћу да емитује светлост одређене таласне дужине (као што је ултраљубичасто светло 3650 или љубичасто-плаво светло 4200) кроз систем филтера у боји као ексцитационо светло, а затим побуђује флуоресцентне супстанце у узорку да емитују флуоресценцију различитим бојама, а затим их посматра кроз појачање сочива објектива и окулара. На овај начин, под јаком контрастном позадином, чак и ако је флуоресценција веома слаба, лако се идентификује и има високу осетљивост. Углавном се користи за проучавање структуре и функције ћелије и хемијског састава. Основна структура флуоресцентног микроскопа састоји се од обичног оптичког микроскопа и неких додатака (као што су флуоресцентни извор светлости, ексцитациони филтер, дихроични разделник снопа и филтер за блокирање, итд.). Флуоресцентни извор светлости —— Обично се користи живина лампа ултра високог притиска (50-200В), која може да емитује светлост различитих таласних дужина, али свака флуоресцентна супстанца има таласну дужину побудне светлости која производи најјачу флуоресценцију, тако да је потребно је додати ексцитационе филтере (углавном ултраљубичасти, љубичасти, плави и зелени ексцитациони филтери), тако да се само одређена таласна дужина ексцитационе светлости преноси на узорак, а сва друга светлост се апсорбује. Након што је свака супстанца озрачена ексцитационим светлом, емитује видљиву флуоресценцију дужу од таласне дужине зрачења за врло кратко време. Флуоресценција има специфичност, која је генерално слабија од ексцитационе светлости. Да би се посматрала специфична флуоресценција, неопходно је блокирати (или потиснути) иза сочива објектива и морају се користити заједно.
Разлика између флуоресцентног микроскопа и обичног микроскопа
1. Режим осветљења је обично епизодичан, односно извор светлости се пројектује на узорак кроз сочиво објектива;
2. Извор светлости је ултраљубичасто светло са кратком таласном дужином и вишом резолуцијом од обичног микроскопа;
3. Постоје два специјална филтера, онај испред извора светлости се користи за филтрирање видљиве светлости, а онај између окулара и сочива објектива се користи за филтрирање ултраљубичастог светла ради заштите очију људи.
Флуоресцентни микроскоп је такође врста оптичког микроскопа, главна разлика је у томе што су њихове таласне дужине побуде различите. Ово одређује разлику између флуоресцентног микроскопа и обичног оптичког микроскопа у структури и употреби.
Флуоресцентни микроскоп је основно средство имунофлуоресцентне цитохемије. Састоји се од извора светлости, система филтерских плоча и оптичког система. Користи светлост одређене таласне дужине да потакне узорак да емитује флуоресценцију, и увећава га кроз сочива објектива и систем окулара да би посматрао флуоресцентну слику узорка.
