Зашто вам је потребан конфокални микроскоп?
1. Оптички микроскопи су достигли стање савршенства кроз напоре и побољшања наших великих претходника. У ствари, обични микроскопи нам могу пружити прелепе микроскопске слике једноставно и брзо. Међутим, десио се догађај који је донео револуционарну иновацију у овај скоро савршен свет микроскопије. Ово је био проналазак „конфокалног микроскопа за ласерско скенирање“. Карактеристика овог новог типа микроскопа је да користи оптички систем који издваја информације о слици само на површини на којој је фокус фокусиран, а добијене информације враћа у меморију слике уз промену фокуса, чиме се добијају потпуне 3Д информације. Жива слика интелигенције. Овом методом се лако могу добити информације о облику површине које се не могу потврдити нормалним микроскопом. Поред тога, за обичне оптичке микроскопе, „повећање резолуције“ и „продубљивање дубине фокуса“ су конфликтни услови, посебно при великим увећањима. Међутим, у конфокалној микроскопији, овај проблем се лако решава.
2. Предности конфокалног оптичког система
Конфокални оптички систем врши осветљење тачке на узорку, а рефлектована светлост такође користи тачкасти рецептор да прими светлост. Када се узорак постави на позицију фокуса, скоро сва рефлектована светлост може доћи до фоторецептора. Када је узорак ван фокуса, рефлектована светлост не може доћи до фоторецептора. Другим речима, у конфокалном оптичком систему, биће приказана само слика која се поклапа са фокусом, а светлосне тачке и бескорисно расејано светло ће бити заштићени.
3. Зашто користити ласер?
У конфокалном оптичком систему, узорак се осветљава у тачки, а рефлектована светлост се такође прима помоћу тачкастог фоторецептора. Због тога постају неопходни тачкасти извори светлости. Ласери су веома тачкасти извори светлости. У већини случајева, извор светлости конфокалних микроскопа користи ласерске изворе светлости. Поред тога, карактеристике ласера као што су монохроматичност, усмереност и одличан облик зрака такође су важни разлози за његово широко усвајање.
4. Посматрање у реалном времену засновано на скенирању велике брзине постаје могуће
За ласерско скенирање, акустични оптички дефлектор (АО елемент) се користи у хоризонталном смеру, а серво електрично контролисано огледало за скенирање зрака (Серво Галвано-огледало) се користи у вертикалном правцу. Пошто акустично-оптичка јединица за отклон нема део механичке вибрације, може да скенира великом брзином, што омогућава посматрање у реалном времену на екрану за праћење. Велика брзина оваквог снимања је веома важна ставка која директно утиче на брзину фокусирања и проналажења позиције.
5. Однос између положаја фокуса и осветљености
У конфокалном оптичком систему, осветљеност је максимална када је узорак правилно постављен на позицију фокуса, а његова осветљеност ће се нагло смањити испред и иза њега (пуна линија на слици 4). Ова осетљива селективност фокалне равни је такође принцип који стоји иза одређивања правца висине и ширења дубине фокуса конфокалног микроскопа. Насупрот томе, нормални оптички микроскоп нема очигледне промене осветљености пре и после позиције фокуса (испрекидана линија на слици 4).
6. Висок контраст и висока резолуција
У обичним оптичким микроскопима, рефлектована светлост из дела ван фокуса ће ометати и преклапати се са делом за фокусирање слике, што ће резултирати смањењем контраста слике. Насупрот томе, у конфокалном оптичком систему, залутало светло изван фокуса и залутало светло унутар сочива објектива су скоро потпуно уклоњене, тако да се може добити слика са веома високим контрастом. Поред тога, пошто светлост два пута пролази кроз сочиво објектива, тачкаста слика се изоштрава, што такође побољшава резолуциону моћ микроскопа.
