Увод у предности и недостатке вишефотонског ласерског скенирајућег микроскопа
Предности вишефотонске ласерске скенирајуће микроскопије:
1. Побуђен црвеном или инфрацрвеном светлошћу, расејање светлости је мало, а расејање малих честица је обрнуто пропорционално четвртом степену таласне дужине.
2. Више расутих фотона из секције за снимање може се прикупити без рупица.
3. Рупа не може да разликује расуте фотоне емитоване из области ван фокуса или области фокуса, а однос сигнал-шум вишефотонског снимања у дубоким слојевима је добар.
4. Ултраљубичасто или видљиво светло које се користи за једнофотонско побуђивање лако се апсорбује и пригушује од стране узорка пре него што сноп достигне фокалну раван, и није лако побудити дубоке слојеве.
5. У смислу посматрања биолошког микроскопа, прво треба да се узме у обзир да се не оштети активно стање самог организма, и да се одржи циркулација воде, концентрације јона, кисеоника и хранљивих материја. У случају посматрања светлости, и топлота и енергија фотона морају остати унутар количине зрачења и светлосне енергије која неће оштетити ћелије.
6. Мултифотонска микроскопија има много предности. Као што су тродимензионална резолуција, дубока пенетрација, ефикасност расејања, позадинско светло, однос сигнал-шум, контрола, итд., сви имају карактеристике које претходни ласерски микроскопи нису имали или нису могли да надмаше.
Недостаци вишефотонске ласерске скенирајуће микроскопије:
1. Само за флуоресцентно снимање.
2. Ако узорак садржи хромофоре који апсорбују побудну светлост, узорак може бити термички оштећен.
3. Резолуција је мало смањена. Иако се може побољшати коришћењем конфокалног отвора у исто време, сигнал се губи.
4. Због ограничења скупих ултрабрзих ласера, цена вишефотонског скенирајућег микроскопа је релативно висока.
