Биомикроскопија у односу на запремину блокова ткива
Биолошка микроскопија До сада су хладна фиксација, замрзнути ултратанки пресеци и сушење замрзавањем рутинске методе за рендгенске микросекције ткива и ћелија. Детаљи ове методе су објашњени на следећи начин:
За биолошке микроскопе са кондензатором, кондензатор се може померати горе-доле да би осветљеност била умерена, а отвор променљивог светла се такође може променити да би се постигла умерена осветљеност од 9б. Ако је светло сунчано, кондензатор се може подићи на одговарајући начин, а отвор променљивог извора светлости може се на одговарајући начин повећати. Ако је светло прејако, кондензаторско сочиво се може на одговарајући начин спустити, а отвор светла који се секу може се на одговарајући начин смањити. Ако се и даље осећате заслепљујуће у овом случају, можете одабрати одговарајући филтер и поставити га на држач испод кондензатора. Овај храст ће моћи да добије сјај који вас задовољава. Наравно, подешавање горњег и доњег положаја кондензатора, подешавање величине отвора променљивог оптичког очитавања и избор одговарајућег филтера захтева одређени период вежбе за стицање искуства.
Веома важно питање у биолошкој микроскопији је да се у процесу узорковања и одвајања ћелија, након сушења замрзавањем и уградње смоле (ФД), након замрзавања ултра танких агрегата, и након сушења замрзавањем, садржај 65 елемената у сваком делу мора се пажљиво руковати. Ћелије које се анализирају не могу се оштетити. Јер рендгенска микроанализа не само да укључује много корака, већ и много кошта. Ако су анализиране ћелије оштећене ћелије или мртве ћелије након дужег времена и вишестепене обраде, веома је жалосно доносити погрешне закључке. На пример, кардиомиоцити одвојени третманом колагеназом имају два облика, један је у облику дугачке шипке, а други је округао. Потоње су умируће ћелије које су оштећене током изолације ћелија.
Биомикроскопија Количина и дистрибуција електролита у ове две врсте ћелија су прилично различите. На је веома висок и К је веома низак у кружним кардиомиоцитима, а концентрација ца у нематодама је веома висока. Након провере другим методама анализе, доказано је да су високи На и низак К округлих ћелија и високи Ца у митохондријама последица оштећења ћелијске мембране током процеса одвајања ћелија. Метода ледено хладне фиксације ћелија и ткива обично је да се прво усвоје гашење и фиксација, а затим складиште у течном азоту. Фиксација гашења је веома важна за ефекат очувања. Живе ћелије или свежа ткива су богата водом. Приликом гашења, делови ћелија или ткива који су у директном контакту са згњеченим расхладним средством (нарочито када се гашење течним азотом) често се прво замрзавају и фиксирају, формирајући тако „љуску“, која омета. уситњени и хладно учвршћени. Стога, када се ради анализа микро-области Кс-лине, често се открије да се у центру већих ћелија налазе кристали леда. Да би се то спречило, супстанца са тачком топљења вишом од оне течног азота, али нижом од оне код 806ц користи се као покварено расхладно средство. Таквих супстанци има много, али најјефтинији је концентровани пропан (тачка кључања - 42.120ц, тачка топљења - 187.10ц, молекулска тежина 44,1), а брзина хлађења је највећа. Али његов недостатак је што је запаљив.
Биолошки микроскоп може ставити мишићно влакно на посебан сталак, тако да када контракција мишићног влакна достигне одређену фазу и треба да се фиксира, одмах покрените млазницу да прска течни пропан на мишићно влакно да га угаси и поправи. Затим су мишићна влакна заједно са рамом извађена и стављена у течни азот. Ако фиксирате крвне ћелије или изоловане ћелије, прво концентрујте ћелије центрифугирањем при малој брзини, пребаците ћелије у сребрну бочицу са добром топлотном проводљивошћу, ставите бочицу у течни пропан и замрзните за фиксацију. Приликом фиксирања панкреаса пацова у лабораторији Халл, два челична блока су претходно охлађена течним хелијумом (или течним азотом), а два бакарна блока су стегнута клештама и постављена на предњи и задњи део панкреаса да се угасе и фиксирају панкреаса. Ткива или ћелије се могу чувати у течном азоту за дуготрајно складиштење након гашења и фиксирања.
Биолошка микроскопија Поред најцењеније методе замрзнутог ултратанког пресека, ево још једне технике депозиције коју користе научници. Супстанца се додаје да би се формирао седимент са компонентом која се анализира да би се имобилизирала пре анализе, а седимент се затим анализира. На пример, људи често користе оксалат и пироантимонат за депоновање ца у мишићним ћелијама. Први није довољно осетљив на ниску концентрацију Ца у цитоплазми; пироантимонат је осетљивији и може да формира депозите густе електроном са слободним Ца у мозгу, али пироантимонат није компатибилан са натријумом, манганом, баријумом, гвожђем. Наслаге се такође формирају и мање су специфичне. Процес припреме узорка је сличан припреми узорака ултратанких пресека обичних трансмисионих електронских микроскопа, разлика је у томе што је 3 процента калијум пироантимоната (фосфатни пуфер физиолошки раствор пХ 7,6) фиксиран 6 сати пре фиксације, а на обојеним ултратанким пресецима мишића, Црне наслаге су уочене у средњим линијама трака А и 2 сваког саркомера, а необојени делови су коришћени за рендгенску микроанализу. Диаминобензидин тетрахидрохлорид (ДАБ) је коришћен за таложење супстанци које садрже хем и тако даље. Комбинација хистохемијске реакције таложења и рендгенског моста за микродиференцијацију може се размотрити у лабораторијама које немају услове за замрзнуте ултратанке пресеке. Полуквантитативно се може урадити према висини врха елемената који се анализирају
