Подешавање система оптичке путање слике светлосног микроскопа и обриса микроскопског прегледа
Подешавање система оптичке путање слике и оквира микроскопског прегледа
Подешавање сликовног оптичког система микроскопа врши се према потребама различитих микроскопских техника. Такозвана микроскопија, укратко, је метода осветљавања која се користи при посматрању узорка кроз микроскоп и техника и начин добијања бољег контраста на слици коју формира узорак. У наставку се укратко описује како је микроскопија сазрела у неколико метода и одговарајући метод подешавања оптичког система за снимање микроскопом.
1. Светло поље преноса:
Ово је најтрадиционалнији и најчешћи метод примене од проналаска микроскопа. Основне компоненте: а. Објективно сочиво: било које сочиво објектива може се користити за посматрање светлог поља; б. Опсег: могу се користити све врсте нишана, по могућности опремљене отвором дијафрагме. Метода подешавања: Након што се подеси Кухлеров систем осветљења у горњем микроскопу, може се применити метода светлог поља. Обим примене: сви обојени делови ткива, размази крви, итд. Мере опреза: а. Када се користи метод посматрања светлог поља, Кухлеров систем осветљења мора бити подешен; б. Дијафрагма видног поља не би требало да се отвара произвољно, а предња сочива кондензаторског огледала треба да буде фактички постављена напоље и у оптичку путању, респективно када се користе сочива објектива од 10×, мање од 10× и више од 10 ×; ц. Дијафрагма бленде кондензаторског огледала не би требало да се користи за подешавање осветљености видног поља, а висина кондензаторског огледала не би требало да се подешава неселективно, или ће резолуција микроскопа бити смањена и резолуција обојеног ткива биће оштећени. резолуција микроскопа и оштећења је прилагођена Кухлер-овом систему осветљења; д. за микрографије, сваку промену у коришћењу увећања сочива објектива, морате подесити дијафрагму бленде кондензаторског сочива, тако да је њена величина тачно једнака нумеричком отвору који се користи у сочиву објектива од 2/3.
2. Метода контраста преношене светлосне фазе:
Ово је савремени микроскопски преглед методе побољшања контраста. Основне компоненте: сочиво објектива са фазним контрастом, светло видно поље и фазни контраст вишенаменски опсерватор, телескоп за фокусирање, зелени филтери.
Методе подешавања:
а. На основу подешавања Кухлеровог система осветљења, јасно фокусирајте узорак користећи методу светлог поља
б. Окрените оптички нишан на Пх1 да бисте поравнали положај скале бројчаника, изаберите сочиво објектива са фазним контрастом 10 × и замените провидни узорак који желите да посматрате.
ц. Искључите један од окулара, замените га центрираним телескопом и фокусирајте се на два фазна контрастна прстена у видном пољу (црни фазни контрастни прстен на објективу и фазни контрастни прстен за пропуштање светлости на кондензаторском сочиву).
д. Два прстена фазног контраста у видном пољу можда се неће нужно поклапати, подесите два уређаја за подешавање на оптику (подешавање левог и десног положаја полуге за подешавање фазног контрастног прстена и подешавање предњег и задњег положаја дугмета за трење) , тако да се прстен за пренос светлости за предње и задње стране десно и лево поклапа са црним прстеном
е. Након подешавања, вратите се на окулар за посматрање и притисните зелени филтер у оптичку путању да бисте посматрали слику фазног контраста узорка.
ф. Када постоје сочива објектива од 20× и 40× за посматрање, сочиво за уочавање треба поставити на позицију Пх2, а када се користи 100 сочива објектива, сочиво за уочавање треба поставити на позицију Пх3.
Обим примене: Погодан је за посматрање провидних, необаљених или необојљивих узорака, као што су све врсте ћелија, жива ткива, необојени или необојени делови ткива, водени организми и тако даље.
3. Метода фазног контраста диференцијалне интерференције:
Да би се превазишао фазни контраст метода посматрања детаља узорка око слике праћених ореолом, маскираће детаље који су требали да се виде, као и узорци или пресеци ткива захтевају прилично танку дебљину, у принципу могу бити дебљи од 10?м и друга ограничења, коришћење принципа интерференције двоструког снопа за пројектовање методе фазног контраста субдиференцијалне интерференције.
Методе подешавања:
а. ДИЦ метода се мора прилагодити на основу тога да је Кулемин систем већ прилагођен
б. Користећи сочиво објектива од 10×, одредите положај фокуса сочива објектива који може јасно видети узорак са светлим видним пољем.
ц. Поставите поларизатор у путању осветљења, уз напомену да треба да буде оријентисан у правцу исток-запад.
д. Окрените точкић кондензатора у положај који одговара употреби сочива објектива 10 ×, тј. ДИЦ 0.3-0.4.
е. Уметните ДИЦ клизач за сочиво објектива 10× на задњој страни објектива или на претварач објектива.
ф. Уметните анализатор у оптичку путању за снимање и имајте на уму да његова оријентација треба да буде југ-север.
г. Замените провидни узорак који желите да посматрате, укључите извор светлости да бисте јасно фокусирали узорак.
х. Подесите ДИЦ уметак тако да слика контраста диференцијалне интерференције постигне најбољи ефекат, односно најочигледнији ефекат рељефа.
и. Истовремено, подесите дијафрагму бленде кондензаторског огледала, тако да је и ефекат контраста оптималан.
ј. Затим фино подесите детаље узорка да видите структуру узорка на различитим нивоима.
к. Ако се уметне комплементарна боја (црвена ретардирајућа плоча првог реда) и истовремено се подеси ДИЦ уметак, у видном пољу се могу видети сјајне боје које се стално мењају, са црвеном, наранџастом, жутом, зеленом, плавом, љубичаста, розе, розе-љубичаста и златно-жута. Подручје примене: провидни или неодрживи делови ткива, дебљине до око 100?м, живо ткиво и живе ћелије у култури, мали живи организми и сл.
