Методе и мере предострожности за коришћење флуоресцентног микроскопа
Начин употребе:
(1) Поставите лист материјала на носач.
(2) Укључите регулатор напона флуоресцентног микроскопа. Затим притисните стартну групу да бисте упалили УВ лампу неће се искључити 15 минута и неће се поново покренути 3 минута након што се искључи.
(3) Окрените ексцитациони филтер на в, дихроични филм на в, изаберите филтер за блокирање од 495 или 475 нм.
(4) Изаберите увФЛ40, увФЛ100 флуоресцентну микроскопију за пријем објектива.
(5) Додајте нефлуоресцентно уље на стакалцу, прво 40 к, а затим 100 к фокусирајући микроскопски. Прикажи флуоресценцију.
(7) Пошто је флуоресцентни материјал ултраљубичастим зрачењем са растом флуоресценције постепено слабио током времена, тако да микроскопски преглед треба често мењати видно поље.
(8) такође може да користи увФЛ10 или увФЛ20 микроскопски материјал са малим увећањем (са малим увећањем без додавања нефлуоресцентног уља).
Метода снимања флуоресцентне слике:
Флуоресцентна слика која се види флуоресцентним микроскопом, једна је са морфолошким карактеристикама, друга је са бојом и сјајем флуоресценције, у процењивању резултата, две се морају комбиновати са свеобухватним судом. Резултати се евидентирају према субјективним показатељима, односно визуелним посматрањем радника. Као опште квалитативно запажање, у основи поуздано. Са развојем технологије и науке, у различитом степену, коришћење објективних индикатора за бележење резултата просуђивања, као што је употреба ћелијског спектрофотометра, анализатора слике и других инструмената. Међутим, резултати забележени овим инструментима такође морају бити комбиновани са субјективном проценом.
Технологија фотографисања са флуоресцентним микроскопом је веома неопходна за снимање флуоресцентних слика, јер се флуоресценција лако избледи и ослаби, да би се тренутно забележили резултати фотографије. Метода је у основи иста као обична микрографија. Само треба да користите брзи фотографски филм као што је АСА200 изнад или 24. изнад. Пошто је ултраљубичасто светло на ефекту флуоресценције, као што су ФИТЦ маркери, у зрачењу ултраљубичастом светлошћу 30с, осветљеност флуоресценције је смањена за 50%. Због тога је брзина експозиције сувише мала да би се ухватила флуоресцентна слика. Флуоресценцијски микроскопи општег истраживања имају полуаутоматске или потпуно аутоматске уређаје за микрофотографију.
Превентивне мере:
(1) Радите у строгом складу са захтевима фабричког приручника за флуоресцентни микроскоп, не мењајте поступак произвољно.
(2) Преглед се врши у тамној просторији. Након што уђете у мрачну просторију, прикључите напајање, упалите живину лампу ултра високог притиска на 5-15 мин, сачекајте док извор светлости не емитује јако светло да се стабилизује и очи се потпуно прилагоде тамној просторији, и затим почните да посматрате узорак.
(3) Да бисте спречили оштећење очију од ултраљубичастог светла, приликом подешавања извора светлости треба носити заштитне наочаре.
(4) проверите време сваки пут до 1 ~ 2х је прикладно, више од 90 минута, интензитет светлости живине лампе ултра високог притиска постепено се смањује, флуоресценција је ослабљена; узорци озрачени ултраљубичастим светлом 3 ~ 5 мин, флуоресценција је такође значајно ослабљена; стога, * не сме бити дуже од 2 ~ 3х.
(5) Живот извора светлости флуоресцентног микроскопа је ограничен, узорак треба да буде централизован, како би се уштедело време и заштитио извор светлости. Када је вруће треба додати хлађење вентилатором, нову сијалицу снимити од почетка употребе времена. Када се лампа угаси и жели да се поново користи, сијалица мора бити довољно охлађена пре паљења. Извор светлости треба избегавати неколико пута.
(6) Посматрајте узорак одмах након бојења, пошто ће флуоресценција постепено опадати током времена. Ако се узорак стави у полиетиленску пластичну кесу која се чува на 4 степена, то може одложити време слабљења флуоресценције и спречити испаравање агенса за заптивање.
(7) Критеријуми за процену осветљености флуоресценције: генерално подељено на четири нивоа, односно 'један' - нема или је видљива слаба флуоресценција. '+' - само јасна видљива флуоресценција. '+ +' - видљиво са светлом
