Принципи и структурне карактеристике флуоресцентне микроскопије
Флуоресцентна микроскопија је употреба високе ефикасности луминисценције тачке, кроз филтрацију система боја да емитује одређену таласну дужину светлости (као што је ултраљубичасто 3650 у или љубичасто-плаво 4200 у) као побудна светлост, ексцитација флуоресцентног материјала унутар узорка емитује низ различитих боја флуоресценције, а затим се увећава кроз објектив и окуларе за посматрање. На овај начин, у позадини јаког контраста, чак и ако је флуоресценција веома слаба, лако се идентификује, висока осетљивост, углавном се користи за проучавање структуре и функције ћелије и хемијског састава. Основна структура флуоресцентног микроскопа састоји се од обичног оптичког микроскопа плус неких додатака (као што су флуоресцентни извор светлости, ексцитациони филтери, сепаратор снопа у две боје и филтери за блокирање, итд.). Флуоресцентни извор светлости – генерално се користи живина лампа ултрависоког притиска (50-200}В), која може да емитује различите таласне дужине светлости, али сваки флуоресцентни материјал има најјачу таласну дужину флуоресценције, тако да је потребно додати филтере за побуђивање (генерално ултраљубичасти, љубичасти, плави и зелени ексцитациони филтер), тако да само одређена таласна дужина ексцитационе светлости кроз зрачење узорака, док се друга светлост апсорбује. Дакле, потребно је додати ексцитациони филтер (обично ултраљубичасти, љубичасти, плави и зелени ексцитациони филтери), тако да само одређена таласна дужина ексцитационе светлости пролази кроз узорак, док се друга светлост апсорбује. Када је свака супстанца озрачена ексцитационим светлом, она емитује видљиву флуоресценцију дуже таласне дужине од оне озрачене светлости за веома кратко време. Флуоресценција има специфичност, генерално слабију од ексцитационе светлости, да би се могла посматрати специфична флуоресценција, сочиво објектива иза потребе за додавањем блокирања (или супресије) мора бити изабрано за употребу.
Флуоресцентни микроскоп и разлика обичног микроскопа
1. Метода осветљења је обично падајуће, односно извор светлости се пројектује на узорак кроз сочиво објектива;
2. Извор светлости је ултраљубичасто светло, са краћом таласном дужином и већом моћи резолуције од обичних микроскопа;
3. Постоје два специјална филтера, онај испред извора светлости се користи за филтрирање видљиве светлости, а онај између окулара и сочива објектива се користи за филтрирање ултраљубичастог светла ради заштите људског ока.
Флуоресцентни микроскоп је такође врста оптичког микроскопа, главна разлика је у томе што су таласне дужине побуђивања различите. Ово одређује структуру флуоресцентног микроскопа и обичног оптичког микроскопа и употребу различитих метода.
Флуоресцентни микроскоп је основни алат за имунофлуоресцентну цитохемију. Састоји се од извора светлости, система филтерских плоча и оптичког система и других главних компоненти. Користи одређену таласну дужину светлости да би стимулисао узорак да емитује флуоресценцију, која се увећава кроз сочива објектива и систем окулара да би се посматрала флуоресцентна слика узорка.
