Вештине и методе флуоресцентне микроскопије
Технички параметри флуоресцентног микроскопа 1. Широкоугаони окулар 2. Ахроматична сочива објектива 3. Конвертор сочива објектива са четири отвора 4. Епифлуоресцентни уређај Плава (Б) Зелена (Г) ексцитациони систем 100В живина лампа 5. Коаксијални механизам за грубо и фино подешавање фокуса: Подесите Опсег фокуса: 15 мм Вредност микропомерања мреже: 0,002 мм 6. Двослојни механички сто Опсег уздужног кретања: 70 мм Опсег бочног кретања: 50 мм
Технички параметри флуоресцентног микроскопа
1. Широкоугаони окулар
2. Ахроматска сочива објектива
3. Носник са четири отвора
4. Епифлуоресцентни уређај плава (Б) зелена (Г) систем побуде 100В живина лампа
5. Механизам за подешавање коаксијалног грубог и финог фокуса: опсег фокуса 15 мм фино померање мреже 0.002 мм
6. Двослојни механички радни сто
Опсег вертикалног померања: 70 мм Опсег бочног кретања: 50 мм
Вештине и методе флуоресцентне микроскопије
(1) Стаклени тобоган
Дебљина стакала треба да буде између 0,8 и 1,2мм. Предебео клизач ће апсорбовати више светлости с једне стране, а са друге стране, побудна светлост не може да се концентрише на узорак. Слајдови морају бити глатки, уједначене дебљине и без очигледне аутофлуоресценције. Понекад се користе слајдови од кварцног стакла.
(2) Поклопно стакло
Дебљина покривног стакла је око 0.17 мм, глатко. Да би се појачало ексцитационо светло, може се користити и интерферентно покривно стакло, које је специјално покривно стакло обложено са неколико слојева супстанци (као што је магнезијум флуорид) које имају различите ефекте интерференције на светлост различитих таласних дужина, што може учинити флуоресценција иде глатко. Узбудљива светлост пролази кроз и рефлектује се, а ова рефлектована побудна светлост побуђује узорак.
(3) Примерак
Кришке ткива или други узорци не би требало да буду превише дебели. Ако је превише дебео, највећи део ексцитационе светлости ће се потрошити у доњем делу узорка, док горњи део који директно посматра сочиво објектива неће бити у потпуности узбуђен. Поред тога, преклапање ћелија или покривање нечистоћа, утичу на процену.
(4) Средство за монтажу
Глицерин се обично користи као агенс за монтажу, који не сме да има аутофлуоресценцију, безбојан је и провидан, а осветљеност флуоресценције је светлија при пХ 8.5-9.5 и није лако брзо да избледи. Због тога се као средство за монтажу обично користи једнака мешавина глицерола и 0.5мол/л раствора карбонатног пуфера са пХ од 90 до 9,5.
(5) уље за огледало
Генерално, када се посматрају узорци са флуоресцентним микроскопима тамног поља и сочивима за урањање у уље, мора се користити имерзионо уље. Најбоље је користити специјално нефлуоресцентно уље за потапање. Уместо тога се може користити и горњи глицерин, а може се користити и течни парафин, али је индекс преламања низак, што има благи утицај на квалитет слике. Утицај.
