Како се флуоресцентна микроскопија разликује од ласерске конфокалне микроскопије
Флуоресцентни микроскоп
1, флуоресцентни микроскоп је да користи ултраљубичасто светло као извор светлости, који се користи за зрачење објекта који се испитује, тако да емитује флуоресценцију, а затим посматра облик објекта и његову локацију под микроскопом. Флуоресцентни микроскоп се користи за проучавање апсорпције, транспорта, дистрибуције и локализације хемијских супстанци у ћелијама. Неке супстанце у ћелији, као што је хлорофил, могу флуоресцирати након зрачења ултраљубичастом светлошћу; постоје неке супстанце које не могу да флуоресцирају саме, али ако су обојене флуоресцентним бојама или флуоресцентним антителима, могу да флуоресцирају и након зрачења ултраљубичастом светлошћу, а флуоресцентна микроскопија је један од алата за квалитативно и квантитативно истраживање ове врсте супстанци.
2, принцип флуоресцентног микроскопа:
(А) извор светлости: извор светлости зрачи различите таласне дужине светлости (од ултраљубичастог до инфрацрвеног).
(Б) извор филтера ексцитације: кроз узорак може произвести флуоресценцију одређене таласне дужине светлости, док блокира побуђивање бескорисне светлости флуоресценције.
(Ц) Флуоресцентни узорак: углавном обојен флуорохромом.
(Д) Блокирајући филтери: блокирају побуђујућу светлост коју узорак не апсорбује да би селективно пренео флуоресценцију, а неке таласне дужине у флуоресценцији се такође селективно преносе. Микроскоп који користи ултраљубичасто светло као извор светлости да би озрачени објекат флуоресцирао. Електронски микроскоп је први пут састављен 1931. године у Берлину, у Немачкој, од стране Кнора и Хароске. Овај микроскоп користи брзи електронски сноп уместо светлосног зрака. Пошто је таласна дужина струје електрона много краћа од светлосног таласа, тако да увећање електронског микроскопа може бити до 800,000 пута, резолуција минималне границе од 0,2 нанометра . 1963. почео је да користи скенирајући електронски микроскоп који се може видети на површини мале структуре објекта.
3, обим примене: користи се за увећање слике ситних објеката. Обично се користи у биологији, медицини, микроскопским честицама и другим запажањима.
Конфокални микроскоп
1, конфокални микроскоп у рефлектованој светлости на путу плус полурефлектујућа полусочива, проћи ће кроз сочиво рефлектоване светлости пресавијено у другим правцима, у свом фокусу на преграду са рупом, рупа се налази у фокус, иза преграде је фотоумножачка цев. Може се замислити да рефлектована светлост пре и после жаришне тачке детекторске светлости кроз овај сет конфокалног система, неће моћи да се фокусира на малу рупу, биће блокирана преградом. Дакле, фотометар мери интензитет рефлектоване светлости у жижној тачки.
2, принцип: традиционални оптички микроскоп користи извор светлости на пољу, слика сваке тачке на узорку ће бити ометана дифракцијом или расипањем светлости од суседних тачака; конфокални микроскоп за ласерско скенирање користи ласерски сноп кроз отвор за осветљење да формира тачкасти извор светлости на узорку у фокалној равни скенирања сваке тачке на узорку, узорак је озрачен, у детекцији рупице на слици , детекцијом рупице након фотомултипликатора (ПМТ) или уређаја за хладну електроспојницу (цЦЦД) тачку по тачку или тачку по тачку или тачку по тачку, интензитет светлости се мери фотометром. цЦЦД) прима тачку по тачку или линију по линију и брзо формира флуоресцентну слику на екрану монитора рачунара. Рупица за осветљење и рупица за детекцију у односу на жижну раван објектива сочива су коњугирана, тачка на жижној равни се истовремено фокусира на рупицу за осветљење и емисиону рупицу, тачка изван жижне равни неће бити у отвору за детекцију у слике, тако да је конфокална слика примерак оптичког пресека, превазилазећи недостатке замућених слика обичних микроскопа.
3, Области примене: медицина, истраживање животиња и биљака, биохемија, бактериологија, ћелијска биологија, ембриологија ткива, наука о храни, генетика, фармакологија, физиологија, оптика, патологија, ботаника, неуронаука, биологија мора, наука о материјалима, електронска наука, механика, нафтна геологија, минералогија.
