ПХ метар - Одређивање и подешавање пХ медијума
На све микроорганизме утиче пХ средине у којој живе. Често, присуство селективних врста сужава пХ опсег у којем расту. Понекад киселост или алкалност медијума такође може деловати као фактор селекције раста. За биохемијске тестне медијуме, међутим, пХ опсег у коме микроорганизми показују тк активност у супстрату је ужи од пХ опсега потребног за раст: стога је важно да се пХ медијума подеси на очекивани опсег. Када лабораторија припрема медијум према саставу медијума, пХ се мора проверити и подесити. Мора се истаћи да чак и за готов синтетички дехидриран медијум који је обезбедио произвођач (посебно за неке основне дехидриране медијуме), коначни пХ треба измерити након израде експерименталног медијума.
Најтачнији начин за мерење пХ средине је пХ метар. Пре употребе, мора се калибрисати стандардним пуферским раствором познатог пХ (обично је пХ 4 до 7). Исперите електроду пХ метра дестилованом водом и уроните је у медијум за културу у чаши, а затим очитајте пХ медијума за културу са скале пХ метра. Сваки произвођач даје детаљна упутства за употребу за сваки тип пХ метра.
Приликом припреме медијума за културу, пХ се може лако подесити коришћењем пХ метра уз механичко мешање. Подлогу за културу треба припремити у посуди (као што је велика чаша) која се може непрекидно мешати. или магнети умотани у тефлон. пХ медијума који садржи агар је потребно подесити након одмрзавања, што се лако ради помоћу магнетне мешалице која се може загрејати. Када подешавате пХ, користите стандардни пуферски раствор познатог пХ да бисте прво калибрирали пХ метар. Затим ставите композитну електроду и отпорни термометар (ако постоји) у медијум, полако додајте одговарајућу количину хлороводоничне киселине и натријум хидроксида са краја чаше даље од електроде, тако да медијум може да достигне и одржи потребну пХ вредност.
Температурна компензација пХ метра треба да узме у обзир утицај температуре на систем електрода: у неким разблажењима и медијима, пХ се значајно мења са температуром. За течне медије и разблажења, пХ се обично може подесити и мерити на 25 степени или на температури на којој се користе.
пХ агар медијума се мора подесити након растварања, а температура растварања је изнад 45 степени: стога пХ чврстог медијума треба одредити на температури његове употребе. У овом тренутку треба користити композитну електроду са равном главом, а температурну компензацију пХ метра треба ручно калибрисати. Приликом припреме медијума за културу, ако се утврди да је пХ медијума за културу различит између стања топљења и стања очвршћавања, то значи да постоји грешка у подешавању пХ.
Слично, када се припремљени медијум стерилише топлотом (нпр. у аутоклаву), он такође може бити подвргнут променама пХ. За дехидрирани медијум, произвођач је ово узео у обзир и обично нема потребе за подешавањем пХ, али пХ медијума који се користи треба пажљиво проверити. Ако се пХ дехидриране агар подлоге мора подесити током поновног растварања или припреме, најбоље је подесити га филтером стерилисаном хлороводоничном киселином и раствором натријум хидроксида након корака стерилизације како би се избегло стварање прегревања медијума. Када се припремају подлоге са различитим сировинама или фармацеутским производима, пХ медијума се мора проверити након аутоклава. Поред тога, ако се утврди да се пХ медијума мења након сваког аутоклава, пХ се може на одговарајући начин подесити приликом припреме медијума. Међутим, и даље је неопходно одредити коначни пХ медијума након стерилизације.
