Припрема и посматрање биолошких узорака за електронске микроскопе
Резолуција микроскопа зависи од таласне дужине светлости која се користи. Електронски микроскоп, који се појавио 1933. године, постигао је знатно већу резолуцију од оптичког микроскопа због употребе електронских зрака са таласним дужинама много краћим од видљиве светлости као извора светлости. Различити извори светлости такође одређују низ разлика између електронских и оптичких микроскопа.
На основу разлика у принципима снимања електронским снопом и начинима на који они делују на узорке, савремени електронски микроскопи су се развили у многе типове. Тренутно се најчешће користе трансмисиони електронски микроскопи и скенирајући електронски микроскопи. Први има укупно увећање које може да варира између 1000-10000000 пута, док други има укупно увећање које може да варира између 20-300000 пута. Овај експеримент углавном уводи припрему две врсте микроскопских узорака, трансмисионе електронске микроскопије и скенирајуће електронске микроскопије.
2, Опрема
1. Сој Есцхерицхиа цоли је нагнут.
2. Раствор или реагенс: пентил ацетат, концентрована сумпорна киселина, анхидровани етанол, стерилна вода, 2% водени раствор натријум фосфоволфрамата (пХ 6,5-8,0), 0,3% поливинил формалдехид (растворен у хлороформу), раствор цитохрома цитохрома ц.
3. Инструменти или други алати укључују обичне оптичке микроскопе, бакарне мреже, порцеланске левке, чаше, петријеве посуде, стерилне капаљке, стерилне пинцете, игле, стаклене плочице, плоче за бројање, машине за вакуумско облагање, сушаре за критичне тачке итд.
3, Оперативни кораци
(1) Припрема и посматрање узорака за трансмисијску електронску микроскопију
1. Третман металне мреже
Узорак оптичког микроскопа се ставља на стакло за посматрање. Међутим, у огледалу за пренос, пошто електрони не могу продрети у стаклени лист, мрежасти материјал се може користити само као носач, који се обично назива мрежа носача. Носећа мрежа се може поделити на различите спецификације због различитих материјала и облика, међу којима се обично користи бакарна мрежа са 200-400 месх (број рупа). Бакарну мрежу треба третирати пре употребе како би се уклонила прљавштина и одржала чиста, иначе ће утицати на квалитет носећег филма и јасноћу фотографија узорка. Бакарна мрежа од 400 месх коришћена у овом експерименту може се третирати следећим методом: прво, потопити и плутати пентил ацетатом неколико сати, затим испрати неколико пута дестилованом водом и на крају потопити и плутати бакарну мрежу у анхидрованом етанолу ради дехидратације. Ако бакарна мрежа и даље није чиста након горе наведених метода, може се потопити у разблажену концентровану сумпорну киселину (1:1) 1-2 минута, или кувати у 1% раствору НаОХ неколико минута, испрати неколико пута дестилованом водом, а затим дехидрирати у безводном етанолу за каснију употребу.
