Принципи и структурне карактеристике флуоресцентне микроскопије

Jan 05, 2024

Остави поруку

Принципи и структурне карактеристике флуоресцентне микроскопије

 

Флуоресцентни микроскоп је употреба високе светлосне ефикасности тачкастог извора светлости, кроз систем за филтрирање боја да емитује одређену таласну дужину светлости (као што је ултраљубичасто 3650 или љубичасто-плаво 4200) као ексцитационо светло, побуђивање флуоресцентног материјала унутар узорак емитује различите боје флуоресценције, а затим се увећава кроз објектив и окуларе за посматрање. На овај начин, у позадини јаког контраста, чак и ако је флуоресценција веома слаба, лако се идентификује, висока осетљивост, углавном се користи за проучавање структуре и функције ћелије и хемијског састава. Основна структура флуоресцентног микроскопа састоји се од обичног оптичког микроскопа плус неких додатака (као што су флуоресцентни извор светлости, ексцитациони филтери, сепаратор снопа у две боје и филтери за блокирање, итд.). Флуоресцентни извор светлости – генерално се користи живина лампа ултрависоког притиска (50-200}В), која може да емитује различите таласне дужине светлости, али сваки флуоресцентни материјал има најјачу таласну дужину флуоресценције, тако да је потребно додати филтере за побуђивање (генерално ултраљубичасти, љубичасти, плави и зелени ексцитациони филтер), тако да само одређена таласна дужина ексцитационе светлости кроз зрачење узорака, док се друга светлост апсорбује. Дакле, потребно је додати ексцитациони филтер (обично ултраљубичасти, љубичасти, плави и зелени ексцитациони филтери), тако да само одређена таласна дужина ексцитационе светлости пролази кроз узорак, док се друга светлост апсорбује. Када је свака супстанца озрачена ексцитационим светлом, она емитује видљиву флуоресценцију дуже таласне дужине од оне озрачене светлости за веома кратко време. Флуоресценција има специфичност, генерално слабију од ексцитационе светлости, да би се могла посматрати специфична флуоресценција, у сочиву објектива иза потребе за додавањем филтера за блокирање (или потискивање).


Његова улога је двострука:
Један је да апсорбује и блокира ексцитационо светло у окулару, како не би пореметило флуоресценцију и оштећење ока.


Други је одабир и пропуштање специфичне флуоресценције, показујући специфичну флуоресцентну боју. Ова два типа филтера морају бити изабрана и коришћена заједно.

 

1digital microscope

Pošalji upit