Предности и мане вишефотонске ласерске скенирајуће микроскопије
Вишефотонска ласерска скенирајућа микроскопија је експериментална метода заснована на технологији ласерског скенирајућег микроскопа, која пружа више могућности **оптичког сечења у 3Д посматрању. Метода мултифотонске ексцитације флуоресценције користи дуге таласне дужине црвене или блиске инфрацрвене светлости за добијање флуоресцентних слика високе резолуције узорака уз минимално убијање активних узорака, што га чини погодним за снимање живих ћелија, посебно дебелих живих ткива као што су мождане кришке, ембриони, целих органа па чак и целих организама.
Предности су следеће:
1, употреба црвене светлости или инфрацрвене светлости, распршивање светлости је мало(расипање одмаличестице и таласна дужина четвртог степена инверзног односа).
2, не захтева рупицу, може прикупити више расејаних фотона из попречног пресека слике.
3, рупица не може да разликује расуте фотоне које емитује област ван фокуса или фокусна област, вишефотонски однос сигнала и шума је добар.
4, једнофотонско побуђивање ултраљубичасте или видљиве светлости која се користи у снопу да дође до фокалне равни пре него што се узорак лако апсорбује и ослаби, није лако до дубоког узбуђења.
5, у посматрању биолошког микроскопа, * прва пажња је да се не оштети активно стање самог организма, да се одржи вода, концентрација јона, циркулација кисеоника и хранљивих материја. У приликама за посматрање светлости, и топлотна и фотонска енергија морају остати у ћелији без оштећења количине зрачења, светлосне енергије.
6, мултифотонски микроскоп такође има много предности. Као што су тродимензионална резолуција, дубински упад, ефикасност расејања, позадинско светло, однос сигнал-шум, контрола, итд., Постоје претходни ласерски микроскопи које немају или имају неупоредиво изван карактеристика.
Вишефотонски конфокални ласерски скенирајући микроскоп је проширен на различита поља истраживања и примене. Способан је за тродимензионално недеструктивно посматрање узорака у њиховом природном стању и може побољшати резолуцију и однос сигнал-шум система. Користећи промену својстава материјала након вишефотонске побуде, такође је могуће постићи тродимензионално складиштење података о висини и тродимензионалну микрофабрикацију у било ком правцу, што има високу примену. Може се веровати да ће даљим развојем машина, материјала, ласерске технологије и других технологија везаних за мултифотонску конфокалну микроскопију, вишефотонски конфокални ласерски скенирајући микроскоп имати већи развој и ширу примену.
Недостаци су следећи:
1, само флуоресцентно снимање.
2, ако узорак садржи хромофоре који могу да апсорбују ексцитационо светло, као такавпигменти, узоракмогу бити термички оштећени.
3, резолуција је мало смањена, иакоможе се побољшати истовременом употребом конфокалног отвора бленде, алидоћи ће до губитка сигнала.
4. Цена вишефотонске скенирајуће микроскопије је висока због ограничења скупих ултрабрзих ласера.
