Вештине и методе коришћења флуоресцентног микроскопа
Технички параметри флуоресцентног микроскопа 1. Широкоугаони окулар 2. Ахроматски објектив 3. Конвертор објектива са четири отвора 4. Емитујући флуоресцентни уређај плава (б) зелена (г) систем побуде 100В живина лампа 5. Коаксијални груби механизам микрофокусирања: опсег фокусирања 15 мм, вредност микро мреже 0,002 мм 6. Опсег уздужног померања двослојног механичког радног стола: 70 мм, опсег бочног кретања: 50 мм.
Вештине и методе коришћења флуоресцентног микроскопа
(1) стаклене плочице
Дебљина клизача треба да буде између 0.8-1.2 мм и 1,2 мм. Превише дебео тобоган неће апсорбовати много светлости с једне стране, и неће учинити да се побудна светлост скупи на узорку с друге стране. Стакалца мора бити глатка, уједначене дебљине и без очигледне спонтане флуоресценције. Понекад су потребни стаклени тобогани Ши Јинг.
(2) Поклопно стакло
Поклопно стакло је око 0.17 мм дебело и глатко. Да би се појачало побудно светло, може се користити и интерферентно покривно стакло, које је врста специјалног покровног стакла са неколико слојева супстанци (као што је магнезијум флуорид) које имају различите ефекте интерференције на различитим таласним дужинама светлости. Може учинити да флуоресценција несметано пролази и рефлектује ексцитационо светло, а ова рефлектована побудна светлост може узбудити узорак.
(3) Примерци
Делови ткива или други узорци не би требало да буду превише дебели. Ако је предебео, највећи део ексцитационе светлости се троши у доњем делу узорка, док горњи део директно посматран сочивом објектива није у потпуности побуђен. Поред тога, преклапање ћелија или маскирање нечистоћа утиче на расуђивање.
(4) средство за заптивање
Глицерол се обично користи као средство за заптивање, које мора бити безбојно и провидно без спонтане флуоресценције. Осветљеност флуоресценције је светла на пХ 8,5 ~ 9,5 и није лако брзо избледети. Због тога се као средство за заптивање често користи еквивалентна смеша глицерола и 0.5 мол/л ПХ9.0 ~ 9.5 карбонатног пуфера.
(5) уље за огледало
Генерално, уље за огледало се мора користити када се узорци посматрају флуоресцентним микроскопом у тамном пољу и уљним огледалом. Најбоље је користити специјално нефлуоресцентно уље за огледало, или се уместо њега може користити горњи глицерин. Може се користити и течни парафин, али је индекс преламања низак, што има благи утицај на квалитет слике.
