Употреба стерео флуоресцентног микроскопа и мере предострожности
Упутства:
(1) Поставите материјал на бину.
(2) Укључите стабилизатор напона флуоресцентног микроскопа. Затим притисните стартну групу да упалите УВ лампу и немојте је искључивати у року од 15 минута, нити је поново покретати у року од 3 минута након што се искључи.
(3) Окрените филтер за побуђивање на в, филтер за раздвајање боја на в и изаберите филтер за блокирање од 495 или 475 нм.
(4) Изаберите увФЛ40, увФЛ100 флуоресцентни објективни микроскоп за микроскопско испитивање.
(5) Додајте нефлуоресцентно уље на стакалцу, прво користите 40 к, а затим користите микроскоп за фокусирање од 100 к да проверите. Појављује се флуоресценција.
(7) Пошто флуоресценција флуоресцентних супстанци постепено слаби са временом када су озрачене ултраљубичастом светлошћу, видно поље треба често мењати током микроскопског прегледа.
(8) УвФЛ10 или увФЛ20 микроскопи са малим увећањем се такође могу користити за преглед материјала (не додаје се флуоресцентно уље када се користе сочива мале снаге).
Метода снимања флуоресцентне слике:
Флуоресцентна слика коју види флуоресцентни микроскоп има и морфолошке карактеристике и боју и осветљеност флуоресценције. Када се процењују резултати, то двоје се мора комбиновати за свеобухватну процену. Резултати се бележе на основу субјективних показатеља, односно визуелног посматрања радника. Као опште квалитативно запажање, у основи поуздано. Са развојем технологије и науке, објективни индикатори се користе за бележење резултата просуђивања у различитом степену, као што су ћелијски спектрофотометри, анализатори слике и други инструменти. Међутим, резултати забележени овим инструментима такође морају бити комбиновани са субјективним просуђивањем.
Фотографија флуоресцентног микроскопа је веома неопходна за снимање флуоресцентних слика. Пошто је флуоресценција лако избледети и ослабити, потребно је снимити резултате у реалном времену. Метода је у основи иста као код обичне фотомикрографије. Само треба да користите фотоосетљиви филм велике брзине као што је АСА200 или изнад или 24. изнад. Пошто ултраљубичасто светло има снажан ефекат на гашење флуоресценције, као што су ФИТЦ маркери, осветљеност флуоресценције ће се смањити за 50 процената када се зрачи ултраљубичастим светлом током 30 секунди. Стога, ако је брзина експозиције сувише мала, флуоресцентна слика се не може снимити. Флуоресценцијски микроскопи општег истраживања имају полуаутоматске или потпуно аутоматске уређаје за фотомикрографију.
Превентивне мере:
(1) Радите стриктно у складу са захтевима фабричких упутстава за флуоресцентни микроскоп и не мењајте програм по вољи.
(2) Преглед се врши у мрачној просторији. Након што уђете у мрачну просторију, прикључите напајање и упалите живину лампу ултра високог притиска на 5-15 минута. Након што је јако светло из извора светлости стабилно, очи се потпуно прилагођавају мрачној просторији, а затим почињу да посматрају узорак.
(3) Да би се спречило да ултраљубичасти зраци оштете очи, приликом подешавања извора светлости треба носити заштитне наочаре.
(4) Време инспекције је пожељно 1-2 сати сваки пут. Ако пређе 90 минута, интензитет светлости живине лампе ултра високог притиска ће се постепено смањивати и флуоресценција ће ослабити; након што се узорак озрачи ултраљубичастим зрацима у трајању од 3-5 минута, флуоресценција ће такође бити значајно ослабљена; стога, не би требало да прелази највише 2-2 сати. 3х.
(5) Животни век извора светлости флуоресцентног микроскопа је ограничен, а узорке треба заједно прегледати како би се уштедело време и заштитио извор светлости. Када је топло време, треба додати вентилаторе да одводе топлоту, а нове сијалице треба снимати од почетка њиховог времена употребе. Када желите да је поново користите након што се лампа угаси, морате сачекати да се сијалица довољно охлади пре него што је упалите. Избегавајте паљење извора светлости неколико пута дневно.
(6) Посматрајте узорак одмах након бојења, пошто ће флуоресценција временом постепено слабити. Ако се узорак чува у полиетиленској пластичној врећици на 4 степена, време слабљења флуоресценције може бити одложено и средство за монтажу може се спречити да испари.
(7) Стандард за процену осветљености флуоресценције: генерално се дели на четири нивоа, односно „један“ – флуоресценција се не види или је слаба. „ плус „—Може се видети само јасно видљива флуоресценција. „ плус плус „—Видљиво и светло
