Разлика између (двоколица, консокалне) флуоресцентне микроскопе и обичног микроскопа
Основни принцип одушевљења од двије фотона је да се на великом густини фотона, флуоресцентни молекули могу истовремено апсортирати две дуге таласне дужине и емитовати краће таласне дужине након кратког периода такозваног узбуђеног животног века; Ефекат је исти као помоћу фотона са половином таласне дужине дуге таласне дужине, узбудити флуоресцентне молекуле. Два узбуђења фотона захтева високу густину фотона, и да би се избегле оштећене ћелије, двоструко фотонски микроскопија користи импулне ласере са високим енергијом. Ласер који је овај ласер има високу вршну енергију и ниску просечну енергију, са ширином импулса само 100 фемтосекунди и фреквенција до 80 до 100 мегахерца. Када користите висок објективни објективни објектив за нумерички отвор за фокусирање фотона пулсираног ласера, густина фотона на фокусној тачки објективних објектива је највиша, а двоструко повишење само у фокусној тачки објективних сочива. Стога, двотоконтронски микроскоп не захтева конфорнални пинху, који побољшава ефикасност детекције флуоресценције.
У општим феноменама флуоресцентности, због ниске густине фотона олакшаног светла, флуоресцентни молекул може истовремено да апсорбује само један фотон, а затим емитирају још један флуоресцентни фотон кроз радијативну транзицију, што је познат као флуоресценција са једним фотоном. За процесе флуоресцентних поступка помоћу ласера као извора светлости, могу се догодити са два фотона или чак више фоноротонских флуоресцентних појава. У овом случају, употребљени извор светлости узбуђења има висок интензитет и густину фотона који испуњава захтев за флуоресцентне молекуле да истовремено апсорбују два фотона. У процесу коришћења општег ласера као извор светлости за узбуђење, густина фотона и даље је недовољна за производњу феномена апсорпције са два фотонарома. Обично се користе женски ласери пулса, са тренутном снагом који стиже до нивоа мегавата. Стога је таласна дужина флуоресценције двоструке фотона краћа од оног од осветљења узбуђења, што је еквивалентно ефекту произведеном од побуђења таласне дужине полуге.
Знање везано за консокалну флуоресцентну микроскопију
Основни принцип конфокалне флуоресцентне микроскопије је да се користи извор тачке да озраче на пример, формирајући добро дефинисано мало светло у фокалној равнини. Флуоресценција емитована са овог места након зрачења прикупља објективне сочиво и враћа се по првобитном путу озрачивања до раздјелника снопа састављена од дихроичког огледала. Спектрометар шаље флуоресценцију директно детектору. Испред извора светлости и детектора је названог и детектора, који се назива и осветљавање и отварање и пене за откривање. Геометријске димензије ове две су доследне, отприлике 100-200 нМ; У поређењу са лаганим тачкама на жаришној равни, њих двоје су коњугат, што значи да светлосни спот пролази кроз низ сочива и на крају се може фокусирати и на и осветљење и пене за откривање истовремено. На овај начин, светлост из фокусне равнине може се конвергирати у распону рупе за откривање, док је раштркана светлост изнад или испод фокусне равнине блокирана изван отвора за откривање и не може се имитирати. Скенирање узорка Поинт по тачкама ласером, фотомултиплиер цев након откривања имена такође добија одговарајућу консоналну слику светлосне тачке тачке, претвара га у дигитални сигнал и преноси га на рачунар и коначно га преноси у јасну консокалну слику целог жаришта на екрану.
