Основе и структурни елементи флуоресцентног микроскопа
Флуоресцентна микроскопија користи тачку са високом светлосном ефикасношћу да емитује светлост одређене таласне дужине (као што је ултраљубичасто светло 3650 ин или љубичасто плаво светло 4200 ин) кроз систем филтера као ексцитационо светло да побуђује флуоресцентне супстанце у узорку да емитује флуоресценцију разне боје Након тога посматрајте кроз увећање објектива и окулара. На овај начин, под јаком контрастном позадином, чак и ако је флуоресценција веома слаба, лако се идентификује и има високу осетљивост. Углавном се користи за истраживање структуре и функције ћелије и хемијског састава. Основна структура флуоресцентног микроскопа састоји се од обичног оптичког микроскопа плус неких додатака (као што су флуоресцентни извор светлости, филтер за побуђивање, двобојни разделник зрака и филтер за блокирање, итд.). Флуоресцентни извор светлости—генерално користите живину лампу ултра високог притиска (50-200В), која може да емитује светлост различитих таласних дужина, али свака флуоресцентна супстанца има таласну дужину побуде која производи најјачу флуоресценцију, тако да филтер за побуђивање (Генерално, постоје ултраљубичасти, љубичасти, плави и зелени ексцитациони филтери), који дозвољавају само ексцитационој светлости одређене таласне дужине да прође и озрачи узорак, док апсорбује другу светлост. Након што је свака супстанца озрачена ексцитационим светлом, емитује видљиву флуоресценцију са већом таласном дужином од таласне дужине зрачења за врло кратко време. Флуоресценција је специфична и генерално слабија од ексцитационе светлости. Да би се посматрала специфична флуоресценција, блокирање (или супресија) се мора додати иза сочива објектива и користити заједно са њим.
Разлика између флуоресцентног микроскопа и обичног микроскопа
1. Метода осветљења је обично епископска, односно извор светлости се пројектује на узорак кроз сочиво објектива;
2. Извор светлости је ултраљубичасто светло, таласна дужина је краћа, а резолуција је већа од оне код обичних микроскопа;
3. Постоје два специјална филтера, онај испред извора светлости се користи за филтрирање видљиве светлости, а онај између окулара и сочива објектива се користи за филтрирање ултраљубичастих зрака ради заштите људског ока.
Флуоресцентни микроскоп је такође врста оптичког микроскопа, главна разлика је у томе што је таласна дужина побуђивања различита. Ово одређује разлику између флуоресцентног микроскопа и обичног оптичког микроскопа у погледу структуре и употребе.
Флуоресцентна микроскопија је суштински алат у имунофлуоресцентној цитохемији. Састоји се од главних компоненти као што су извор светлости, систем филтерских плоча и оптички систем. То је употреба одређене таласне дужине светлости да се узорак потакне да емитује флуоресценцију и да се посматра флуоресцентна слика узорка појачавањем сочива објектива и система окулара.
