Три врсте посматрања под микроскопом
И. Светло поље БФ (Бригхт фиелд БФ)
Светло поље БФ је познати начин микроскопије, који се широко користи у патологији и тестирању за посматрање обојених пресека, а сви микроскопи су способни да обављају ову функцију.
Светао поље
ИИ. Тамно поље ДФ (Дарк фиелд ДФ)
Тамно поље ДФ је заправо осветљење тамног поља. Разликује се од светлог поља по томе што не посматра директно осветљену светлост, већ светлост која се рефлектује или прелама од објекта који се испитује. Као резултат, видно поље постаје тамна позадина, док се испитивани објекат појављује као светла слика.
Принцип тамног видног поља заснива се на Тиндаловом феномену у оптици, прашина у случају јаког светла кроз директну светлост, људско око се не може приметити, то је због јаког светла око узрока. Ако је светлост усмерена косо на њега, чини се да честице повећавају величину услед рефлексије светлости и постају видљиве људском оку.
Посебан додатак потребан за посматрање тамног поља је уочавац у тамном пољу. Одликује се тиме што се не дозвољава да светлосни сноп пролази кроз испитивани објекат одоздо према горе, већ мења путању светлости тако да је усмерена укосо према испитиваном објекту, тако да светлећа светлост не улази директно у објекат. сочива објектива, а светла слика се формира коришћењем рефлектоване или дифрактиране светлости са површине испитиваног предмета. Резолуција посматрања тамног поља је много већа од посматрања у светлом пољу, * до 0.02-0.004
Даркфиелд
ИИИ. Фазни контраст ПХ
У развоју оптичке микроскопије, успешан проналазак фазног контраста ПХ је важно достигнуће у савременој микроскопској технологији. Као што знамо, људско око може да разликује само таласну дужину (боју) и амплитуду (светлост) светлосних таласа, за безбојне и светле биолошке узорке, када светлост прође, таласна дужина и амплитуда се не мењају много, и тешко је да посматра примерак у посматрању светлог поља.
Микроскоп са фазним контрастом користи разлику светлосног опсега испитиваног објекта за микроскопско испитивање, односно ефикасно користи феномен интерференције светлости да промени неразлучиву фазну разлику људског ока у разлику амплитуде, па чак и безбојну и транспарентну супстанце могу постати јасно видљиве. Ово умногоме олакшава посматрање живих ћелија, па се микроскопија фазног контраста широко користи у инвертованим микроскопима.
Основни принцип фазноконтрастне микроскопије је да се разлика у оптичком опсегу видљиве светлости која се преноси кроз узорак претвара у разлику у амплитуди, чиме се повећава контраст између различитих структура и чини их видљивим. Светлост се прелама кроз узорак и одступа од првобитне путање светлости, док се касни за 1/4λ (таласна дужина). Ако се 1/4λ поново повећа или смањи, разлика оптичког домета постаје 1/2λ, а интерференција између два снопа фотосинтезе се појачава након што се оси два зрака ометају, а амплитуда се повећава или смањује, тако да побољшање контраста. У структури, фазни контрастни микроскоп има две посебне карактеристике које се разликују од обичног оптичког микроскопа:
1. прстенаста дијафрагма (анулардиапхрагм) се налази између извора светлости и кондензатора, улога је да светлост кроз кондензатор формира шупљи конус светлости, фокусирајући се на узорак.
2. фазна плоча (прстенаста фазна плоча) у сочиву објектива обложена фазном плочицом магнезијум флуорида, директно или дифрактовано светло може бити одложено фазом 1/4λ. Постоје две врсте:
1. Фазна плоча: директна светлост одложена 1/4 λ, две групе светлосних таласа коаксијално додавање светлосног таласа, повећање амплитуде, структура узорка од околног медија је светлија, формирање светлог контраста (или негативног контраста) .
2.Б фазна плоча: дифрактована светлост се одлаже за 1/4 λ, две групе светлосних таласа након спајања осе светлосног таласа се смањују, амплитуда постаје мања, формирање тамног контраста (или позитивног контраста ), структура је тамнија од околног медијума.
