Две најчешће коришћене микроскопске методе посматрања
1, Опсервација тамног поља
Тамно видно поље је заправо осветљење тамног поља. Његове карактеристике се разликују од светлог видног поља, јер не посматра директно светлећу светлост, већ посматра рефлектовану или распршену светлост објекта који се прегледа. Дакле, видно поље постаје тамна позадина, док предмет који се прегледа представља светлу слику.
Принцип тамног поља заснива се на оптичком Тиндаловом феномену, где људско око не може да примети честице прашине када су изложене јакој светлости због дифракције изазване јаком светлошћу. Ако се светлост косо пројектује на њу, чини се да честице повећавају запремину услед рефлексије светлости, чинећи их видљивим људском оку.
Посебан додатак потребан за посматрање тамног поља је рефлектор тамног поља. Његова карактеристика је да не дозвољава снопу светлости да прође кроз објекат одоздо према горе, већ мења путању светлости тако да буде косо усмерена ка објекту, тако да светло осветљења не улази директно у сочиво објектива, и користи светлу слику формирану рефлексијом или дифракцијом светлости која се налази на површини која је много већа у односу на површину тамног посматраног поља. посматрања светлог поља, достижући до 0,02-0,004
2, метода инспекције огледала фазног контраста
Успешан проналазак фазноконтрастне микроскопије у развоју оптичких микроскопа је важно достигнуће у савременој микроскопској технологији. Знамо да људско око може да разликује само таласну дужину (боју) и амплитуду (светлост) светлосних таласа. За безбојне и провидне биолошке узорке, када светлост пролази, таласна дужина и амплитуда се не мењају много, што отежава посматрање узорка у светлом пољу
Микроскоп фазног контраста користи разлику у дужини оптичке путање објекта који се прегледа за преглед огледала, ефикасно користећи феномен интерференције светлости да трансформише фазну разлику коју људско око не може разликовати у разлику амплитуде. Чак и безбојне и провидне супстанце могу постати јасно видљиве. Ово у великој мери олакшава посматрање живих ћелија, па се фазно контрастна микроскопија широко користи у инвертним микроскопима
Основни принцип фазно-контрастне микроскопије је претварање оптичке разлике путање видљиве светлости која пролази кроз узорак у амплитудну разлику, чиме се побољшава контраст између различитих структура и чини их јасним и видљивим. Након проласка кроз узорак, светлост се подвргава преламању, одступајући од првобитне оптичке путање и касни за 1/4 λ (таласна дужина). Ако се разлика оптичке путање повећа или смањи за још 1/4 λ, разлика оптичке путање постаје 1/2 λ, а интерференција између два светлосна снопа се повећава или смањује након што се осовина комбинује, побољшавајући контраст У погледу структуре, микроскопи фазног контраста имају два
посебне разлике од обичних оптичких микроскопа:
1. Између извора светлости и кондензатора налази се прстенаста дијафрагма, а њена функција је да формира шупљи конус светлости који пролази кроз кондензатор и фокусира се на узорак.
2. Угаона фазна плоча: Фазна плоча обложена магнезијум флуоридом се додаје сочиву објектива, што може да одложи фазу директне или дифрактиране светлости за 1/4 λ. Може се поделити на два типа:
(1) . А+фазна плоча: Одложите директно светло за 1/4 λ и додајте два сета светлосних таласа након комбиновања оса. Амплитуда се повећава, а структура узорка постаје светлија од околног медија, формирајући светао контраст (или негативан контраст)
(2) . Б+фазна плоча: Одложите дифракцију светлости за 1/4 λ и одузмите светлосне таласе након комбиновања осе два сета светлосних зрака, што резултира смањењем амплитуде и формирањем тамног контраста (или позитивног контраста). Структура постаје тамнија од околног медија
