Зашто је увећање уљног сочива веће од обичног објектива?
Разлози због којих се бактерије морају поправити пре бојења у микробиолошким експериментима:
1: Убијте ћелије и учините да се боја лако боји.
Друго: Учините да се бактерије залепе за стакло и да их вода не испере лако.
Приликом фиксирања, сушите полако. Ако заиста желите да убрзате процес, можете га осушити неколико пута на растојању изнад пламена алкохолне лампе. Не сушите стакло тако да се загреје, иначе може уништити бактеријски животни облик.
Бојење по Граму и микроскопско посматрање бактерија
Експериментални принцип
Принцип бојења по Граму: Различите реакције бактерија на бојење по Граму су последица различитог састава и структуре њихових ћелијских зидова. Ћелијски зид грам-позитивних бактерија је углавном мрежа пептидогликана. Када се третира етанолом, величина пора мрежне структуре постаје мања због дехидрације, а пропустљивост се смањује, што узрокује формирање комплекса кристално љубичастог јода. Супстанца се не елуира лако и остаје у ћелијама. Након деколоризације и противбоје, плаво-љубичаста боја примарне боје је и даље задржана. Пептогликански слој ћелијског зида грам-негативних бактерија је танак и има висок садржај липида. Због тога, током деколоризације, липиди се растварају етанолом (или ацетоном), а пермеабилност ћелијског зида се повећава, чинећи кристално љубичасто-јодни комплекс. Релативно се лако елуира. После контрабоје контрабојом, ћелије су обојене црвеном бојом контрабоја. Принцип микроскопског снимања: Савремени обични оптички микроскопи користе два система сочива, окуларе и сочива објектива, за увећање слика, па се често називају сложеним микроскопима. У оптичком систему микроскопа, перформансе сочива објектива су најкритичније. Уљно сочиво има највеће увећање и најважније је за микробиолошка истраживања. Главна сврха додавања капи уља за сочива између стакала и сочива је да се повећа осветљеност и резолуција микроскопа. Коришћење уља уместо ваздуха као медијума за ширење светлости смањује рефракцију или укупну рефлексију светлости, чинећи посматрану слику јаснијом.
Потражите колоније бактерија које ћете посматрати под микроскопом са малим увећањем (наставите да померате стакалцу, ако осетите црвену сенку, одмах зауставите, подесите увећање, ако није колонија, наставите да гледате), подигните цев сочива , а затим пређите на уљно сочиво. Додајте кап кедровог уља на подручје узорка и користите грубо подешавање да пажљиво спустите цијев сочива тако да уљно сочиво буде уроњено у уље за сочиво и скоро у контакту са узорком. Подигните кондензатор на највиши положај и отворите отвор бленде. Користите грубо подешавање да полако подижите цев сочива док се слика објекта не појави у видном пољу и користите фино подешавање да бисте је учинили јасним и у фокусу.
